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    氨中毒实验报告

    来源:书业网 时间:2016-03-13

    篇一:氨中毒,机能实验

    氨中毒在肝性脑病发病中的作用

    (浙江中医药大学 2009临床医学专业滨江2班7组,20092090210)

    摘要:通过复制家兔急性肝功能不全模型,用十二指肠灌注复方氯化铵法,来探究氨中毒对家兔脑功能影响;通过用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病,来探讨其治疗机制。全班分为三大组,其中第1.2组为假手术组,第3,4组为轻症状治疗组,第5,6,7组为症状明显抢救组。

    Abstract: through the replication of rabbit acute liver insufficiency model, with duodenal perfusion compound chloride method, to explore ammonia poisoning; the effect of rabbit brain function Through using ear rim intravenous glutamate treatments for hepatic encephalopathy, to discuss the treatment mechanism. The class is divided into three groups, the first for JiaShouShu group, 1.2 groups for the first 3 groups in treatment group, the first light symptoms 5, 6, 7 group for symptoms first-aid group.

    关键词:氨中毒;肝性脑病;肝功能不全

    Keywords: ammonia poisoning; Hepatic encephalopathy; Hepatic insufficiency

    引言和背景:肝性脑病是继发于严重肝脏疾病的一系列精神神经综合症。正常情况下,血氨的来源与清除保持动态平衡,而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。病理情况下当肝功能严重受损时,或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多,或经侧枝循环进入体循环,均可导致血氨升高。增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织,通过干扰脑组织的能量代谢,使脑内神经递质发生改变等作用,引起脑的功能障碍,从而出现相应的症状和体征谷氨酸可与血中过多的氨结合而成为无毒的谷氨酰胺,由尿排出,进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢,改善中枢神经系统的功能。肠道给予醋酸溶液可使肠道PH降低,减少氨的重吸收。【1】

    材料和方法: 1.实验材料

    1.1对象:家兔(2.0kg);

    1.2实验试剂:氨基甲酸乙酯,复方氯化铵溶液,复方谷氨酸钠溶液,醋酸,生理盐水。 1.3实验仪器:10ml注射器和50ml注射器及针头,手术剪,镊子,止血钳,兔手术台,棉线若干,婴儿秤,缝针,导管。 2.实验方法

    2.1实验分组 本组实验为症状明显抢救组,出现角弓反张开始抢救。

    2.2麻醉 家兔称重,按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射10ml氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

    2.3急性肝功能不全动物模型复制 从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口,打开腹腔;暴露肝脏,向下压肝脏,剪断肝与横膈之间的镰状韧带,再将肝叶上翻,钝性分离肝胃韧带, 使肝叶游离,辨明肝脏各叶,用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶根部一周,结扎肝脏。

    2.4找出十二指肠,找其上壁血管较少的一处做一环形缝合,在环形中间剪一个小口,沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm,切口荷包缝合固定导管,用止血钳关闭腹腔切口。 2.5试剂注射每隔5min向十二指肠插管中注入25g/L复方氯化铵溶液5ml,观察并记录各项指标的变化,直至出现全身性抽搐、角弓反张为止,记录所用的复方氯化铵溶液的总量,并计算每公斤体重的用量。

    2.6治疗:自耳缘静脉缓慢注入25g/L复方谷氨酸钠溶液20ml/kg,并按5ml/kg剂量向十二指肠注入10g/L醋酸,观察并记录治疗后症状有无缓解。 结果:

    本组结果,共注射了35ml复方氯化铵溶液,当注射到20ml时,家兔开始出现嘴角微抽,到25ml时,家兔嘴角抽搐明显,到30ml时,出现全身性的抽搐抖动,到35ml时,家兔全身性抽搐明显,并发生角弓反张现象。对其实施抢救,最终死亡。

    班级结果统计

    手术

    实验类型

    组数

    前呼吸频率

    第一

    假手术组

    组 第二组 第三

    治疗组

    组 第四组 第五组

    抢救组

    第六组 第七组

    讨论:氨的毒性作用

    (1)降低CNS内Na+-K+-ATP酶的活力:NH3与其他毒性代谢产物如硫醇、酚、短链脂肪酸等有协同毒性作用,能直接损害BBB及神经细胞膜上的Na+-K+-ATP酶活力。BBB酶活力降低时,则BBB酶屏障作用减

    氨中毒实验报告

    弱,某些在正常情况下被该酶分解的毒性产物如GA-BA,可以不受阻挡地进入CNS,引起HE。脑神经细胞和星形胶质细胞膜上的Na+-K+-ATP酶有

    40 46 46 37 未记录 32 33

    第一次给药呼吸频率 42 50 44 37 未记录 43 45

    第二次给药呼吸频率 72 52 49 42 未记录 56 58

    第三次给药呼吸频率 66 54 50 48 未记录 60 65

    40min后仍未发生 40min后仍未发生 33min36s 15min 23min 25min 30min

    40ml 50ml 40ml 30ml 23ml 35ml 35ml

    17.31 18.52 11.4 10.34 10.9 15.21 17.5

    未死亡 / / 未记录 / /

    / / 95ml 2ml 42ml 50ml /

    抽搐痉挛发生时间

    用药总量

    药物体重比

    死亡时间

    复发谷氨酸钠用量

    很高的活力,以维持CNS兴奋性传导离子梯度,NH3可通过与K+竞争抑制Na+-K+-ATP酶活力,不仅可引起神经冲动传导障碍,且可引起星形胶质细胞水肿或脑水肿。

    (2) 干扰CNS的能量代谢:正常情况下,葡萄糖通过BBB进入CNS时,是依赖其酶系统逆浓度差转运至CNS内,BBB功能受损时,葡萄糖逆浓度差转运减少;此外,高NH3血症时,NH3通过α-酮戊二酸-谷氨酸-谷氨酰胺途径代谢,消耗大量的α-酮戊二酸;以上分别影响CNS的能量供应及干扰其能量代谢。

    (3)干扰谷氨酸能神经传递:谷氨酸是中枢神经(CNS)的兴奋性神经递质,也是脑中分布最广的一种递质。正常情况下,谷氨酸能突触(glutamateric synapse)的神经冲动传导,是通过谷氨酸-谷氨酰胺循环来调节的。NH3由BBB进入CNS后,首先由星形细胞摄取,在其谷氨酰胺合成酶催化下,生成谷氨酰胺,后者一部分进入突触前神经元,另一部分则汇入脑脊液(CSF)内。突触前神经元内的谷氨酰胺,在其谷氨酰胺酶作用下,生成谷氨酸,贮存于囊泡内并释放至突触间隙,一部分与突触后神经元的谷氨酸受体结合,由此启动谷氨酸能的神经传递,另一部分则由星形细胞再摄取,重新开始另一轮谷氨酸-谷氨酰胺循环。高氨血症时,星形细胞内的谷氨酸与NH3结合大量被消耗而减少,相应地谷氨酰胺生成明显增加;前突触神经元内谷氨酰胺,因谷氨酰胺酶活力受NH3的毒性作用而减弱,不能生成谷氨酸,从而阻断了正常的谷氨酸-谷氨酰胺循环,干扰谷氨酸能的神经传递。近代研究还表明:细胞内谷氨酰含量过高时,还可引起细胞毒性脑水肿。

    (4)干扰神经的动作电位:NH3可使神经元的氯离子驱出泵灭活,使神经元去极化,抑制突触后兴奋性电位的形成以及抑制轴突的传导。 谷氨酸钠的作用分析

    血氨增高以后,随血流到达脑组织的氨增多,氨与脑内α-酮戊二酸结合,生成谷氨酸及谷氨酰胺,使α-酮戊二酸消耗,而血脑屏障又阻碍了血中α-酮戊二酸进入脑组织,这样使脑内α-酮戊二酸减少,三羧酸循环发生障碍,脑组织得不到足够的能量供应而发生功能紊乱甚至昏迷。根据这个原理,应用谷氨酸钠治疗肝昏迷,它可以和氨结合成谷氨酰胺,以降低血氨,有一定疗效。 醋酸的作用分析

    醋酸可降低血液pH值,可以中和血液中呈碱性的氨,并有效阻止氨继续通过血脑屏障进入脑内。 注意事项:

    1.剪镰状韧带要小心,勿伤及膈肌、肝脏及后方的下腔静脉。

    2.游离肝脏时,动作宜轻柔,以免损伤肝脏。结扎线应扎于肝叶根部,结扎要牢固。 3.十二指肠插管不要插向胃的方向,插管结扎要牢固,避免药液外漏。 4.做好抢救准备,谷氨酸钠溶液有刺激性,注射时避免漏出血管。

    结论:复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响,而肝可解氨中毒,醋酸灌肠佐以静脉注射谷氨酸钠对肝性脑病有明显的解毒作用。

    参考文献:

    陆源,林国华,杨午鸣.机能学实验教程.第二版.北京:科学出版社,2010.6

    篇二:有机磷中毒实验报告

    有机磷酸脂类中毒及解救

    一、实验目的

    观察有机磷酸脂类农药美曲磷脂(敌百虫)中毒后出现的症状和体征;观察阿托品和碘解磷定对美曲磷脂中毒的解救效果,并比较两药解毒作用的特点和作用原理;学习血液中胆碱酯酶活性的检查方法。

    二、实验原理

    有机磷酸脂类农药进入机体后,与胆碱酯酶呈难逆性结合,一直胆碱酯酶活性,使其丧失水解乙酰胆碱的能力,造成乙酰胆碱在体内大量堆积,产生一系列急性中毒症状。 阿托品为选择性的M胆碱受体阻断剂,很大剂量时还可阻断N1受体,可与乙酰胆碱竞争占领M,N1受体,阻断乙酰胆碱对这些受体的激动作用,因而有效的解除有机磷酸脂类中毒的M样症状和N1样症状,是解救有机磷酸脂类中毒的对症治疗药物。

    碘解磷定时有机磷酸脂类中毒的特效解救药,因其可使胆碱酯酶复活,回复胆碱酯酶水解乙酰胆碱的能力,因而能彻底解除有机磷酸脂类农药急性中毒的症状和体征,但其对循环和呼吸的解救作用起效较慢。是解救有机磷酸脂类中毒的对因治疗药物。

    利用血液中胆碱酯酶能够分解乙酰胆碱,产生醋酸使PH改变的原理,以溴麝香草酚蓝作指示剂,可获得不同颜色,将此颜色与已知PH标准管相比,即可测知血样的PH大小。PH愈小,胆碱酯酶活性愈大。

    三.实验对象

    健康家兔,体重2-3kg左右,雌雄不拘。

    四、实验药品和器材

    5%敌百虫,0.1%硫酸阿托品,2.5%碘解磷定;注射器(1ml、2ml、5ml、20ml各一支),7号、6号针头,瞳孔测量尺,烧杯,滤纸,试管,移液枪,吸头,试管架,手术刀片,干棉球,婴儿磅秤,听诊器,秒表,血红蛋白吸管,兔固定盒,微机酸度计,恒温水浴箱。

    五、实验方法与步骤

    取家兔两只,称重,编号,观察和测量家兔的正常指标,呼吸、心率、大小便、唾液、瞳孔、肌肉紧张及有无肌震颤情况,并记录在表中。

    六、实验项目:

    (1) 从家兔耳缘静脉取血作正常胆碱酯酶活性检查。取血法:先轻弹兔耳缘静脉,使其充分扩张,用手术刀片割破约2mm伤口,让血液自流,以血红蛋白吸管取血至20cm(相当0.02ml血液),立即将此血移入事先准备好盛有0.04%溴麝香草酚兰1ml的试管中;共取血2次,合计血样0.04ml,充分振摇,混合均匀;再加1%乙酰胆碱0.5ml,摇匀后,置于37°水浴中保温45-60min,观察其颜色反应,用微机酸度计测定pH并记录数值。

    (2) 甲兔从耳缘静脉注射5%敌百虫50mg/kg,每隔5min观察上述指标有何改变,待中毒症状明显时,记录作用时间,再按上法取血,测定胆碱酯酶活性,记录pH。同时从耳缘静脉注射0.1%阿托品1mg/kg,再每隔5min观察上述指标有何改变?当毒蕈碱样作用消失时(约10min),记录作用时间,再按上法取血,测定胆碱酯酶活性,记录pH(本兔实验完毕后,以PAM50mg/kg静脉注射,以防兔子死亡)。

    (3)乙兔按甲兔同样方法产生敌百虫中毒后,以2.5%PAM50mg/kg,代替阿托品,每隔15Min注射一次,共三次,当PAM对敌百虫中毒的解散作用未发生前,即第三次注射PAM后,即刻和15min时分别按上法取血,测定胆碱酶活性,记录作用时间和PH

    4从实验所得PH用下列公式计算药物对胆碱酯酶活力的估计影响

    7.6-用药后的PH/7.6-用药前的PH=用药后胆碱酯酶活力

    七、实验结果预测

    兔号 药物和用量 瞳孔唾液分泌 大小 肌震呼吸 PH

    大小

    (mm)

    甲 用药前

    5%敌百便 颤 8— ++ — — — ++ ++ + 7.4 ++ 虫 3.5 ml

    0.1%阿托

    品3.5 ml

    乙 用药前

    5%敌百

    虫3.6 ml

    2.5%碘解磷

    定3.6 ml

    5 8 — 8 — 5 ++ 6 + — ++ — — ++ ++ + — — ++ — 7.4 + ++ — +

    篇三:氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用-机能学

    浙江中医药大学实验报告

    日期:2011-11 地点:机能学实验室15109

    氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察

    【摘要】1.目的:①复制家兔急性肝功能不全模型,用十二指肠灌注复方氯化铵法,观察氨中毒对家兔脑功能影响;②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病,探讨其治疗机制。2.方法:全班分为五大组,其中第一组为肝叶不结扎型,第二组为肝叶结扎,也做手术,但不注射氯化铵。第三组为发病后不治疗,其余小组为症状明显抢救组。本小组做了第一组。3.结果:复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响,而肝可解氨中毒,复方谷氨酸钠也可缓解其作用。4.结论:肝具有解毒作用,肝功能不全在肝性脑病的发生中占极大地作用。

    【关键词】氨中毒 肝性脑病 复方谷氨酸钠

    【 Abstract 】 1. Purpose: (1) copy of acute liver not whole model, with duodenal perfusion

    compound ammonium chloride method, observation ammonia poisoning brain function of rabbit influence; (2) with the ear margin intravenous sodium glutamate treatments for hepatic encephalopathy, discussed the mechanism of treatment. 2. Methods: the whole class is divided into five groups, among which the first group for model group, the second group for the treatment group, and the third for JiaShouShu group, the fourth group for symptoms first-aid group, to prevent the fifth group. 3. The result: compound ammonium chloride can make the rabbit affected by brain function, and liver for ammonia poisoning, compound sodium glutamate also can alleviate its role. 4. Conclusion: liver with

    detoxification role, liver function is all in the occurrence of hepatic encephalopathy up greatly effect.

    【 Key Words 】 ammonia poisoning hepatic encephalopathy compound glutamic acid sodium

    1实验材料

    1.1对象:家兔(2.7kg);

    1.2实验试剂:氨基甲酸乙酯,复方氯化铵溶液,复方谷氨酸钠溶液;

    1.3实验仪器:10ml注射器、50ml注射器及针头,手术剪,镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管;

    2实验方法

    2.1实验分组 本组实验为第一小组

    2.2麻醉 家兔称重,按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射13.5ml氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

    2.3急性肝功能不全动物模型复制

    从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口,打开腹腔;暴露肝脏,向下压肝脏,剪断肝与横膈之间的镰状韧带,使肝叶游离,辨明肝脏各叶,用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周,不结扎肝脏。 找出十二指肠,找其上壁血管较少的一处做一环形缝合,在环形中间剪一个小口,沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm,切口荷包缝合固定导管,用止血钳关闭腹腔切口。 2.4实验观察

    2.4.1观察并记录兔一般情况,呼吸(频率、幅度),角膜反射、对刺激的反应等指标。然后试剂注射 前两次分别向十二指肠内注入10ml的复方氯化铵溶液,之后的注射量都为5ml每次注射间隔5min,直至全身性抽搐、角弓反张为止,仔细观察并记录所用的复方氯化铵溶液。 2.4.2 治疗

    按20ml/kg体重剂量自耳缘静脉缓慢注入25g/L复方谷氨酸钠溶液,并按5ml/kg体重剂量向十二指肠注入10g/L醋酸进行治疗处理,观察症状有无缓解。

    3实验结果

    从以上实验数据及现场实验,兔子出现全身紫绀现象,最后也没有出现全身抽搐现象。说明本实验最后失败。主要原因可能为注入麻药后,兔子的代谢产物因全身肌肉活动的减缓而逐渐堆积,到最后堵塞了气管及血管,从而出现紫绀现象。

    现从其他小组获得数据并对结果进行讨论 4小组讨论

    4.1假手术的目的:假手术组与模型组的不同点是其肝叶健全,即肝功能健全。主要用于对比证明肝对氨有解毒作用,肝功能不全的家兔对氨的解毒作用明显低于肝功能健全的家兔,说明肝有解氨中毒的作用。 4.2复方氯化铵溶液对肝性脑病的作用机理,肝大部分结扎在实验中的作用:

    4.2.1据氨中毒学说,正常情况下,血氨的来源于清除保持动态平衡,而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。在结扎大部分肝的基础上灌注氯化铵导致血氨增高,增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织,通过干扰脑组织的能量代谢,使脑内神经递质发生改变,引起脑的功能障碍,出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状。

    4.2.2肝大部分结扎术在实验性肝性脑病中的作用:采用家兔大部分肝结扎,是为了复制急性肝功能不全的动物模型,造成肝解毒功能急剧降低,在此基础上经十二指肠灌入复方氯化铵溶液,导致肠道中氨生成增多并吸收入血。

    4.3家兔呼吸频率和肌紧张的改变

    4.3.1家兔呼吸频率的改变:由实验数据可以看出,给药后家兔的呼吸频率是加快的,可以猜测家兔呼吸频率的增加是由于氨中毒引起的。

    4.3.2随着实验的进行家兔的肌紧张加剧,以至于出现抽搐甚至角弓反张等表现。

    4.3.3说明:血氨浓度升高,干扰脑组织的能量代谢,主要是干扰葡萄糖的生物氮化过程,而脑组织随时都要依赖血液中的葡萄糖提供能量。氨与脑内的α-酮戊二酸结合,生成谷氨酸,影响糖代谢,使ATP产生不足,产生谷氨酰胺为抑制神经的递质,并使脑内兴奋性神经递质减少,并且氨对神经细胞膜也有抑制作用是神经细胞兴奋性异常,并干扰神经传导活动。其中乙酰胆碱有扩张血管减慢心率的作用,从而可见家兔呼吸频率加快的原因。而其中肌紧张加剧可能由于脑组织中氨大量增加使大量谷氨酸转化成谷氨酰胺使氨中毒早期生成γ-氨基丁酸的底物-谷氨酸减少,引起脑内抑制性递质γ-氨基丁酸减少有关。 4.4复方谷氨酸钠溶液的影响和作用机理:

    4.4.1注射复方谷氨酸钠溶液后可以缓解家兔氨中毒的症状,且治疗组的效果最好,作为预防则其效果不大。

    4.4.2作用机理:谷氨酸可与血中过多的氨结合成为无毒的谷酰胺,由尿排出,进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢,改善中枢神经系统的功能。

    5结论

    结扎肝脏后,注射氯化铵溶液,使血氨升高而引起肝性脑病;肝脏对氨具有清除作用,所以不结扎肝脏不会发生氨中毒;谷氨酸钠可以治疗肝性脑病。

    6注意事项

    6.1肝脏手术时,动作宜轻柔,以免肝脏破裂出血。 6.2剪断镰状韧带时,注意不要损伤肝脏与膈肌。

    6.3十二指肠插管方向要向空肠方向,并防止复方氯化铵溶液溶液溢出漏入腹腔。